一、細胞轉染簡介:
隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展,轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中,其應用越來越廣泛。
理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。而ZETA LIFE的淋巴懸浮細胞轉染試劑采用第三代多肽小分子新型材料轉染技術,是目前轉染效率較高的方法,同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。且不需要更換培養(yǎng)基;特點是不需要換液,無細胞毒性,轉染效率高,適用細胞種類多,可轉染質粒DNA、siRNA及小動物活體轉染。其它物理和化學介導的轉染方法,則各有其特點。
二、操作步驟
提前 1 天接種細胞:細胞匯合度在 60-80%左右,再進行轉染。
核酸復合物制備:將核酸與轉染試劑按照 1:1 關系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。
在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復合物:根據參考用量在細胞中加入核酸復合物,并輕輕混勻;細胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。
細胞換液:轉染 24 小時后對細胞進行正常換液,懸浮細胞轉染過程中不用換液。
分析結果:質粒 DNA 轉染 48-72 小時后熒光檢測轉染效率,48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選,則在轉染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉染后 9 小時熒光檢測轉染效率,48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。
三、淋巴懸浮細胞轉染試劑
1、產品名稱
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包裝規(guī)格
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600025 0.25ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600050 0.5ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600075 0.75ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600150 1.5ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600500 5ml
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD601000 10ml
3、儲存條件
常溫運輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復凍融。
四、淋巴懸浮細胞轉染效果熒光圖和明場圖
深圳市安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國代理商。Advanced DNA RNA轉染試劑大量現貨,均經過反復充分驗證,轉染效果好且重復性佳,提供完整售后服務和技術支持。尊敬的客戶您如在訂購過程中遇到任何問題都可以與我司客戶經理聯系尋求幫助。